В работе, опубликованной сейчас по собственной природе Способы, Банкир Хари, врач философии, начальник раздела лаборатории NIBIB на High Resolution Optical Imaging (HROI), обрисовывает его новые улучшения классической микроскопии Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF). Микроскопия TIRF освещает пример под острым углом так, дабы свет думал назад, осветительный лишь узкий срез примера, что есть очень близко к покровному стеклу. Данный процесс формирует весьма высококонтрастные изображения, по причине того, что он ликвидирует солидную часть фона, расфокусированного, легкого, что берут простые микроскопы.
Тогда как микроскопия TIRF употреблялась в цитобиологии на протяжении многих лет, это создаёт размытые изображения мелких изюминок в клетках. В прошлом способы микроскопии суперрезолюции относились к микроскопам TIRF, были в состоянии улучшить резолюцию, но такие попытки постоянно ставили под угрозу скорость, лишение возможности на светло изображение возражает тому перемещению скоро. В следствии большое количество клеточных процессов остаются через чур мелкими либо стремительными, дабы замечать.
его команда и Банкир осознали, что, если они имели возможность бы забрать скоростной, микроскоп суперрезолюции и поменять его, дабы функционировать как микроскоп TIRF, они имели возможность взять пользу обоих. Момент структурировал микроскопию освещения (iSIM), развитый лабораторией Банкира в 2013, может записать видео на уровне 100 кадров в секунду, которое больше чем в 3 раза стремительнее, чем большая часть фильмов либо интернет-видео. Но у iSIM нет контраста, что делают микроскопы TIRF.
Команда проектировала несложную «маску», которая заблокировала солидную часть освещения от iSIM – имитация микроскопу TIRF. Объединение преимуществ обоих типов микроскопии разрешило исследователям замечать скоро переезжающий объекты на порядок стремительнее, чем другие микроскопы в аналогичной резолюции.
«Микроскопия TIRF была около больше 30 лет, и столь полезно, что это, возможно, будет около для, по крайней мере, следующих 30», сообщил Банкир. «Отечественный способ усиливает пространственное разрешение микроскопии TIRF, не ставя под угрозу скорость – что-то, что не имеет возможности сделать никакой второй микроскоп. Мы сохраняем надежду, что это оказывает помощь нам разъяснить быстродействующую биологию, которая имела возможность бы в противном случае быть скрыта либо запятнана вторыми микроскопами так, дабы мы имели возможность лучше осознать, как биологические процессы трудятся».К примеру, с новым микроскопом, его команда и Банкир смогли следовать за скоро перемещением частицы Rab11 около плазменной мембраны клеток человека. Приложенный к молекулярному грузу, каковые транспортируются около клетки, эти частицы перемещение так скоро, что они запятнаны, в то время, когда изображенный вторыми микроскопами.
Они кроме этого применяли собственную технику, дабы продемонстрировать пространственное распределение и динамику HRas, белок, что был вовлечен в облегчение роста злокачественных опухолей. Как со всеми микроскопами, созданными командой Банкира, исследователи смогут связаться с лабораторией, дабы испытать микроскоп либо купить свободную схематику разработки.